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產品目錄

TaKaRa BcaBEST? RNA2步法反轉錄PCR擴增試劑盒

品名: TaKaRa BcaBEST? RNA2步法反轉錄PCR擴增試劑盒
品牌: TaKaRa
型號: RR023A
  • 產品詳情
  • 規格參數
  • 商品名稱:BcaBEST RNA PCR Kit Ver.1.1

  • 商品編號:SPU2021050500

  • 上架時間:2022-01-06






■ 制品內容 (Code No.: RR023A : 100次量*1
BcaBEST Polymerase (22 U/μl)50 μlRNase Inhibitor (40 U/μl)25 μlRandom 9 mers (50 μM)50 μlOligo dT Primer (50 μM)50 μlRNase Free dH2O1 mlBca-Optimized Taq (5 U/μl)25 μl2 × Bca lst Buffer1.25 ml × 2 支5 × Bca 2nd Buffer800 μldNTP Mixture (各10 mM)50 μlMgSO4 (25 mM)500 μlControl F-1 Primer*2 (20 μM)25 μlControl R-1 Primer*3 (20 μM)25 μlPositive Control RNA (2 × 105 copies/μl)25 μl  *1 反轉錄反應10 μl,PCR反應體系50 μl,可使用100次。*2 Positive Control RNA用上游引物。*3 Positive Control RNA用下游引物。

■ 制品說明
PCR(Polymerase Chain Reaction;聚合酶鏈式反應)是一種體外擴增DNA的簡單而有效的方法。雖然原理上PCR法是擴增DNA,RNA不能直接被擴增,但是經過反轉錄酶的作用把RNA反轉錄成cDNA后,PCR法便可應用于RNA的解析了。目前,此方法已廣泛應用于RNA的構造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表達解析等多種領域。本試劑盒含有從RNA反轉錄到cDNA以及擴增此cDNA所必需的全部試劑,即用Bacillus caldotenax來源的BcaBEST Polymerase從RNA合成cDNA,然后在同一試管內加入應用LA PCR技術研制的Bca-Optimized Taq擴增此cDNA。此外,使用BcaBEST Polymerase進行反轉錄反應的最適溫度是65℃,所以對具有復雜二級結構的RNA特別適合。 
■ 各種引物的序列
引物名稱各引物序列Random 9 mers  5′-NNNNNNNNN-3′Oligo dT Primer  包含Takara特別設計的dT區域。本序列與TaKaRa RNA PCR Kit(AMV)Ver.3.0(Code No. RR019A/B)及TaKaRa RNA LA PCR Kit(AMV)Ver.1.1(Code No. RR012A)中的Oligo dT-Adaptor Primer的序列不同,沒有M13 Primer M4區域。Control F-1 Primer  5′-CTGCTCGCTTCGCTACTTGGA-3′Control R-1 Primer  5′-CGGCACCTGTCCTACGAGTTG-3′

■ 試劑盒的原理

BcaBEST RNA PCR的原理圖

■ 試劑盒特點
RNA模板  適用于所有RNA (對富含GC的mRNA及具有復雜二級結構的mRNA特別有效)擴增片段大小   5 kb以下反轉錄酶   BcaBEST Polymerase (最適溫度65℃)DNA聚合酶   Bca-Optimized TaqRNase Inhibitor   必須使用 (試劑盒中含有)合成cDNA第一條鏈的引物  Random 9 mers、Oligo dT-Adaptor Primer或 特異性下游PCR Primer 可供選擇操 作   在同一反應管中進行 (反轉錄酶在進行PCR反應前須進行高溫失活)


BcaBEST?RNAPCRKitVer.1.1
品牌CodeNo.產品名稱包裝量
TakaraRR023ABcaBEST?RNAPCRKitVer.1.1100次
TakaraRR023B(A×2)BcaBEST?RNAPCRKitVer.1.1200次


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