| B族溶血性鏈球菌（Streptococcus agalactiae ；GBS）屬于革蘭氏陽性菌，是人泌尿生殖道和腸道的常在菌，新生兒敗血癥及出生后3個月時的腦膜炎、高齡者的侵襲性感染主要是由B族溶血性鏈球菌感染所引起的。通過培養(yǎng)檢測GBS時，存在檢測時間長、檢測靈敏度低等問題。 本制品是以GBS來源的編碼組氨酸激酶的dltS基因為目的基因，使用Real Time PCR儀，可快速對所有GBS進行特異性檢測的試劑盒。 本制品使用了Hot Start法用DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq? HS，可以有效地抑制在配制反應液時發(fā)生的引物錯配及引物二聚體引起的非特異性PCR擴增。本制品采用Cycling Probe法進行檢測，Cycling Probe法是由RNA和DNA構成的雜合探針與RNase H組合使用的高靈敏度檢出法，能夠高效率地檢出擴增過程中及擴增結束時的目的基因片段。Cycling Probe內部含有RNA堿基，一端標記熒光物質，另一端標記熒光淬滅物質，當探針處于完整狀態(tài)時，由于熒光淬滅作用抑制熒光物質發(fā)出熒光，但當探針與擴增產物中的互補序列雜交后，RNase H在RNA部分將探針切斷，淬滅抑制作用解除，熒光物質發(fā)出熒光。通過測定熒光強度，能夠實時監(jiān)控擴增產物量。 制品中檢測GBS來源的dltS基因用探針的熒光物質使用了FAM標記，內參照（Internal Control）檢測用探針的熒光物質使用了ROX標記。在同一反應管內可以對GBS的特異性dltS基因及內參照同時進行擴增，通過兩種不同熒光標記的探針可以對dltS基因及內參照同時檢出。其中，對內參照反應的檢測，可以監(jiān)控反應是否正常進行，防止假陰性結果。本檢測無需電泳，簡單快速。 本制品是與Dr.Kimiko Ubukata，Department of Infectious Diseases，Keio University School of Medicine 聯合研發(fā)的。 |
