| ■ 制品內容 Plasmid pG-KJE8 (10 ng/μl)100 μl Plasmid pGro7 (10 ng/μl)100 μl Plasmid pKJE7 (10 ng/μl)100 μl Plasmid pG-Tf2 (10 ng/μl)100 μl Plasmid pTf16 (10 ng/μl)100 μl |
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| 【注意】本制品僅限用于科研目的，凡用于商業用途，須獲得Takara公司授權許可。了解詳細信息以及獲取相關許可文件，請致電4006518761或郵件聯絡service@takarabiomed.com.cn。 |
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| ■ 貯存溶液 Tris-HCl (pH 8.0)10 mM EDTA1 mM |
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| ■ 制品說明 |
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| 蛋白質的結構和功能分析是后基因組學領域面臨的挑戰之一，現已受到廣泛關注。表達的大量重組蛋白質需要對其結構和功能進行測定，為了滿足這一需求，便開發了多種表達系統。大腸桿菌由于系統簡單，在表達系統的選擇上范圍廣泛，因此通常被用作蛋白質表達的宿主菌。但是，外源蛋白質在E.coli中表達時，常常出現表達的蛋白質形成包涵體或被蛋白酶降解的情況，原因大多是表達的蛋白質沒能進行正確的折疊，這不利于研究蛋白質功能。已證實，分子伴侶 (Molecular Chaperones) 或稱伴侶蛋白參與蛋白質的折疊過程。為探究蛋白質的體內折疊機理，已投入了大量的研究工作。HSP Research Institute, Inc.在分子伴侶研究領域做出了顯著的貢獻。 本Chaperone Plasmid Set含有五種類型的質粒，每一種質粒都能有效表達不同類型的伴侶蛋白組，各伴侶蛋白組協同作用、共同參與蛋白質折疊。據報道，目的蛋白質與其中一種“Chaperone team”共同表達，便可增加可溶性蛋白質的回收率，而使用通常方法，由于包涵體的形成，這些表達蛋白質常常是不可回收的 (參見圖1)。圖1. 伴侶蛋白對胞內蛋白質合成體系的作用〈可使用大腸桿菌表達體系〉伴侶蛋白質粒含有pACYC的復制起點和氯霉素抗性基因 (Cmr基因)，通常應用在大腸桿菌表達體系中，與ColE1型、具有氨芐抗性 (Ampr) 篩選標記的表達載體共存。各伴侶蛋白質基因位于araB啟動子或Pzt-1 (tet) 啟動子下游，而目的基因處于lac或其它啟動子的控制之下，目的蛋白質與伴侶蛋白可分別誘導表達。另外，質粒上也具備啟動子必要的元件 (araC或tetR)。需注意的是該伴侶蛋白質粒不可以與含有氯霉素抗性基因的表達質粒共同使用。例如，常用的pET系列載體等可以使用E.coli BL21 (DE3) 作為宿主，卻不可以使用E.coli BL21 (DE3) pLysS和E.coli BL21 (DE3) pLysE，因為它們分別包含了帶有Cmr基因、pACYC復制起點的pLysS或pLysE質粒。此外，可以考慮使用的宿主還有E.coli JM109。 質粒伴侶蛋白啟動子誘導物抗性標記 pG-KJE8 dnaK-dnaJ-grpEaraB L-ArabinoseCm groES-groELPzt-1 Tetracyclin pGro7 groES-groELaraB L-ArabinoseCm pKJE7 dnaK-dnaJ-grpEaraB L-ArabinoseCm pG-Tf2 groES-groEL-tigPzt-1 TetracyclinCm pTf16 tigaraB L-ArabinoseCm表1：各質粒編碼的伴侶蛋白質種類及誘導物 ■ 保存-20℃。 ■ Chaperone Plasmid載體圖譜 |
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