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產品目錄

百迪二氫葉酸還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞 1×106cells/T25培養瓶

品名: 百迪二氫葉酸還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞 1×106cells/T25培養瓶
品牌: 百迪生物
型號: C5753
  • 產品詳情
  • 規格參數

產品概述

來源倉鼠卵巢
形態貼壁、上皮樣
培養IMDM培養基+10%FBS+HAT添加劑+1%P/S 37℃ 5%CO2
傳代0.25%胰蛋白酶消化2-3min,比例1:2-1:3
產品簡介二氫葉酸還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞(DHFR-deficient Chinesehamster ovary cell)CHO/dhFr-為二氫葉酸還原酶缺陷細胞。細胞貼壁生長,呈上皮樣,細胞生長依賴于HT(次黃嘌呤-胸腺嘧啶),在細胞培液中添加氨甲喋呤可以防止對藥物低抗性的回變細胞的生長。該細胞常用作外源融合蛋白的表達,在疫苗生產和藥物研發等方面有著廣泛的應用。
收貨指南1. T25細胞瓶到貨后處理方案:
(1) 驗貨:培養瓶上標簽、培養瓶完好性以及瓶口是否有漏液;
(2) 處置:75%酒精對培養瓶消毒后,放入37℃,5% CO2的培養箱靜置培養2-4小時后,進行顯微觀察、拍照,作為售后維權依據;
(3) 注意:貼壁細胞在運輸過程中發生細胞脫落,這是正常現象,靜置后可恢復貼壁。
2. 凍存管到貨后處理方案:
(1) 驗貨:包裝的標簽、包裝內是否有干冰、凍存管完好性;
(2) 處置:盡快復蘇(見培養方法)或程序降溫后轉移至液氮中保存。
培養方法1.培養基:
IMDM培養基;10% 胎牛血清(FBS);1%青霉素-鏈霉(P/S), 1×HAT。
2. 復蘇:
(1)解凍:用鑷子將凍存管浸于37 ℃水浴;反復搖晃,迅速完成解凍;
(2)離心:噴灑75%酒精消毒后,在無菌環境下,打開凍存瓶,用移液器將細胞連同凍存液移至含1 mL完全培養基的10 mL離心管中,室溫1200 rpm離心3-5 min,細胞沉于離心管底部;
(3)培養:將上清液輕輕棄去,加2 mL完全培養基,輕柔懸起細胞,然后將所有細胞懸液移至含有3 mL完全培養基的T25培養瓶中,于37 ℃,5% CO2培養箱中培養;
(4)觀察:每日觀察細胞生長狀態(培養基顏色、細胞貼壁情況、形態與密度等)并拍照。
3. 傳代:
細胞密度達80%-90%開始傳代
(1)清洗:無菌下吸出培養基,用37 ℃預熱的PBS清洗一次;
(2)消化:加1 mL 0.25%胰蛋白酶消化液,轉動培養瓶令其浸潤所有細胞,室溫(或37 ℃)消化,顯微鏡下觀察到細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回超凈臺,輕敲幾下培養瓶后加1 mL完全培養基終止消化;
(3)離心:用移液器輕柔吹勻后然后將懸液轉移至10 mL離心管中,在1200 rpm離心3-5 min;
(4)培養:無菌下棄上清液,加1 mL完全培養基懸起細胞并移至T25培養瓶中;按1:2-1:3比例添加完全培養基,用移液器輕柔吹勻后,分裝至培養瓶中,于37 ℃,5% CO2培養箱中培養。
生物安全等級1請在無菌環境中操作,避免污染;為了保護細胞的穩定性,細胞傳代次數不宜過多;為了結果的可靠性,實驗前請確認細胞狀態良好;嚴格遵守生物安全操作規程。
免責聲明本產品僅用于科研目的,不得用于臨床診斷、治療等用途。用戶應遵循國家和地區的法律法規,自行承擔使用本產品所產生的一切風險和責任。請在使用前仔細閱讀本說明書,并按照指導操作。如有任何疑問或需要進一步信息,請與我們聯系。

產品詳情


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