磺胺類藥物在豬肉中的殘留檢測——樣品前處理改善方法

　　1、合作實驗單位：浙江省獸藥飼料監察所、浙江省畜產品質量安全檢測中心

　　2、依照方法：國家農業行業標準 NY5029—2001

　　3、樣品：豬肉

　　4、國標規定的提取和純化過程如下：

　　稱取組織樣品5g(精確到0.1g)，加入乙腈25ml， 無水硫酸鈉少許(血清除外)，勻漿后，以3000r/min 的速度離心5min。分離后的殘渣再用25ml 乙腈處理，振蕩10min 后，以3000r/min 的速度離心5min。合并兩次的上清液，加入正己烷30ml，振蕩10min 后，以3000r/min 的速度離心5min，取下層液體，加入正丙醇10ml，50 攝氏度下減壓干燥(1) ，殘留物用95%乙腈3ml 溶解，過Sep Pak 氧化鋁B 柱。用95%乙腈5ml 過柱，不收集，再用70%乙腈10ml 洗脫后，洗脫液中加入5ml 正丙醇，50C 下減壓干燥(2)后，殘留物用2.0ml流動相溶解，所制樣液用高效液相色譜儀進行檢測。

　　5、目前使用的儀器：

　　BUCHI 旋轉蒸發儀R-200+VACCUMBRAND 真空隔膜泵 2 套

　　6、實驗過程中碰到的問題：

　　1) 處理的樣品數量大，平均每天處理60 個樣品，每次20～30ml 樣品量;每天同時用

　　2 套旋轉蒸發儀處理，2 個人平均每人每天處理30 次，每次蒸發大概需要8～10min(不含中間轉換時間)。操作過程繁瑣、時間長。

　　2) 無法進行真空度控制，樣品在蒸發過程中容易暴沸。并且溶液來不及冷凝全部被帶到真空泵中。

　　7、解決方案：

　　使用的儀器：

　　BUCHI 12 位快速蒸發儀(Multivapor12)+BUCHI 真空隔膜泵(V-700)帶真空控制器(V-855)

　　選擇的實驗：

　　因為第二步減壓干燥是含有30%的水較難蒸餾，所以我們直接選擇了第二步來做實驗。

　　蒸發的溶液：樣品+10ml 70%乙腈(30%水)+5ml 正丙醇，大概20ml

　　處理的樣品數量：一次12 個

　　操作過程：

　　1) 儀器連接、準備完畢，Multivapor12 預熱到50C。

　　2) 將 12 個樣品分別倒入對應編號的12 根樣品管。

　　3) 將 12 根樣品管放入儀器內，蓋好真空蓋，開始旋轉。

　　4) 在真空控制器 V-855 上設置減壓蒸餾的程序：常壓快速到250mbar,3min 內到80mbar 維持10min,再降到40mbar(水在50C 時被蒸發出來的真空度為40mbar—參考V-855 內的溶劑數據庫).

　　5) 按“開始”鍵后，真空泵開始按照程序抽真空。

　　6) 樣品蒸到盡干，實驗結束操作時間：整個操作時間25min 左右。

　　問題：在真空度40mbar 蒸餾水時，乙腈已被完全蒸出并冷凝到回收瓶內，但是乙腈在40mbar的真空度時會再次蒸發、暴沸，影響水的蒸餾速度。

　　解決辦法：1)、在接收瓶下放一盛有冰塊的杯子，提供更好的冷凝。

　　2)、在蒸完乙腈后，停止蒸餾，將接收瓶倒空。然后直接將真空度降到40mbar蒸餾水。

　　結論：使用BUCHI 的12 位快速干燥儀只需要25min 就可以同時處理完12 個樣品，而且解決

　　了在操作過程中不易控制的暴沸問題，并將大部分溶劑冷凝回收。

　　簡介BUCHI 快速干燥儀MULTIVAPOR

　　來源：作為旋轉蒸發儀的供應商，BUCHI 公司早在幾年前，就根據客戶的需求開始研發一款可以同時蒸發多個樣品的儀器。經過幾年的實驗和測試，BUCHI 公司于2008 年初推出了這款同時處理6 或12 個樣品的快速干燥儀。

　　儀器原理：快速干燥儀的原理如同旋轉蒸發儀，儀器本身可以提供旋轉和水浴夾套加熱功能，并且通過與真空泵和真空控制器的連接，可以進行減壓蒸餾。

　　儀器優勢：

　　1、可以同時處理 6(最大有效容積120ml)或

　　12(最大有效容積30ml)個樣品

　　2、每個樣品都是獨立密封的，不會有交叉污染

　　3、采用透明的玻璃圓筒，可以看到蒸餾的情況

　　4、可以使用通用的試管、離心管和 PSE 管等

　　5、即可以購買獨立成套儀器，也可以和現有的旋轉蒸發儀配置聯用。

　　6、節省人力成本